梅毒の臨床検査

梅毒はウイルスではなくスピロヘータによって引き起こされます。スピロヘータは、細菌と原生動物の中間に位置する単細胞の原核微生物です。細胞は非常に細く、らせん状で、柔らかく、柔軟性があり、鞭毛はありませんが、特殊な曲げやねじりの動きをしたり、ヘビのように動いたりすることができます。二分裂によって増殖します。これまでの臨床検査には、トレポネーマ・パリダム検査、梅毒血清検査、脳脊髄液検査が含まれていました。遺伝子診断技術の発展に伴い、PCR技術を応用した梅毒トレポネーマDNAの検出により、梅毒の診断は正確、迅速、高感度になりました。

1. 梅毒トレポネーマ検査

（I）検査方法

1. 暗視野顕微鏡検査：スライドガラスを使用して皮膚病変から組織滲出液またはリンパ節穿刺液をこすり取り、活動性トレポネーマ・パリダムを観察する。

2. 免疫蛍光染色：蛍光顕微鏡下では緑色の梅毒トレポネーマが観察されます。

3. 銀染色法（Warthin-starry 法）や銀染色法（Levoaditis 法）または蛍光抗体染色法などによる梅毒トレポネーマの生検では、色が濃い茶色でらせん構造をしており、真皮毛細血管の周囲に位置する梅毒トレポネーマを検出できます。銀染色の陽性結果は、梅毒トレポネーマに類似した他の物質と混同しやすいため、慎重に解釈する必要があります。特異的蛍光検査の方が信頼性が高いです。

（II）スピロヘータの同定

顕微鏡検査では、トレポネーマ・パリダムは、フランベジア、風土病梅毒、ピンタという 3 つの非性病性スピロヘータと区別できます。さらに、トレポネーマ・デンティコラ、トレポネーマ・ミクロティピカ、トレポネーマ・ソフティス、性器スピロヘータとも区別する必要があります。

1. イチゴ腫、風土病梅毒、ピンタは、3 つの非性病性スピロヘータです。これらは、梅毒スピロヘータと形態学的には区別できませんが、疫学、病歴、臨床症状の点で区別できます。

2. トレポネーマ・パリダム：ボレリア属スピロヘータの一種で、トレポネーマ・パリダムよりも長く、口腔内、特に歯の隙間に生息します。

3. トレポネーマ・パリダム：トレポネーマ・パリダムよりも短く、ピッチも短く、動きも不規則で、両端が中央よりもわずかに広い。主に歯垢中に存在します。

4. ソフトスピロヘータ：らせんの数が少なく、不規則で動きが速く、形状が頻繁に変化する、まばらなスピロヘータです。皮膚潰瘍に生息します。

5. 性器スピロヘータ：梅毒スピロヘータよりも短く、大きくて不規則なスピロヘータで、性器の陰嚢内で増殖します。頻繁に洗浄しない人では検出率が高くなります。

6. その他: らせん状網状繊維、フィブリンフィラメント、繊毛、赤血球の糸などのらせん状の物体と区別します。

2. 梅毒血清学的検査

梅毒の血清学的検査は、使用される抗原に応じて 2 つのカテゴリに分けられます。

(a) 非トレポネーマ・パリダム抗原血清検査では、カルジオリピンを抗原として使用し、血清中の抗カルジオリピン抗体（レアギンとも呼ばれる）を測定します。この検査は感度は高いものの特異度は低く、生物学的偽陽性になりやすい傾向があります。早期梅毒患者を適切に治療すると、レアギンは消失することがあります。早期に治療を受けなかった患者の場合、後期にレアギンが減少したり、消失したりすることもあります。現在では、有効性、再発、再感染を観察するためのスクリーニングおよび定量検査として一般的に使用されています。

1. 性病研究実験室検査（VDRL）；カルジオリピン、ホスファチジルコリン、コレステロールを抗原として使用し、定量的および定性的な検査に使用でき、試薬と対照血清が標準化されており、コストが低い。この方法は一般的に使用されており、操作も簡単ですが、結果を読み取るために顕微鏡が必要です。欠点は、第1期梅毒の感度が高くないことです。

2. 迅速血漿レアギン検査 (RPR): これは VDRL 抗原の改良版です。感度と特異性は VDRL と同様です。利点は結果を肉眼で読み取ることができることです。

3. 非加熱血清レアギン USR も VDRL 抗原の改変体であり、VDRL と同様の感度と特異性を備えています。

（B）トレポネーマ・パリダム抗原血清学的検査：生または死のトレポネーマ・パリダムまたはその成分を抗原として使用し、抗トレポネーマ抗体を測定します。この検査は感度と特異度が高く、通常は確認検査として使用されます。この検査は血清中の抗トレポネーマ・パリダムIgG抗体を検出するもので、患者が適切な治療を受けたとしても、抗体は長期間存在したり、生涯にわたって消失したりすることがあり、血清反応は陽性のままになります。そのため、治療の効果を観察するために使用することはできません。

1. 蛍光トレポネーマパリダム抗体吸収試験（FTA-ABS 試験）：この方法は、より感度が高く、特異性の高いトレポネーマ検査です。

2. トレポネーマ・パリダム赤血球凝集反応検査（TPHA）：感度と特異度が高く、操作も簡単ですが、第1期梅毒のFTA-ABS検査ほど感度は高くありません。

3. トレポネーマ・パリダム不動化試験（TPI）；ニコル株スピロヘータ（生）を患者血清（抗体を含む）に加えた後、補体の関与によりスピロヘータの活動を阻害することができる。トレポネーマ・パリダムの50%以上が動かなくなったら陽性です。この検査は特異性および感度が高いですが、高価な機器が必要であり、操作が難しいため、研究用途にのみ使用されます。

3. トレポネーマ・パリダムを検出するための遺伝子診断技術

トレポネーマ・パリダムは体外で培養することができません。臨床検体中のトレポネーマ・パリダムを検出する最も感度が高く信頼性の高い方法は、ウサギ感染試験 (RIT) です。RIT は生きたトレポネーマ・パリダムの存在を確認できるため、トレポネーマ・パリダムの検出に一般的に使用されている標準的な方法です。しかし、新生児や成人の梅毒の日常的な診断に RIT を使用することは現実的ではありません。梅毒の血清学的診断は感染の確認と治療に非常に有意義ですが、早期梅毒の診断には感度が低く、先天性梅毒や神経梅毒の診断には特異性が十分ではありません。血清学的検査は先天性梅毒の補助診断として使用されます。主な問題は、無症状の感染乳児と、母親が梅毒血清学的検査で陽性である非感染乳児を区別することです。母親の IgG が胎児に伝染する可能性があるため、母親の体液性免疫反応と乳児の抗体反応を区別できないことが困難です。また、IgGは生涯存在するため、治療結果の評価が困難です。